熒光染料是指吸收某一波長(zhǎng)的光波后能發(fā)射出另一波長(zhǎng)大于吸收光的光波的物質(zhì)。25%的熒光效率是電致激發(fā)的限制,那么為何熒光染料材料的量子效率不超過(guò)25%?
電子和空穴復(fù)合的時(shí)候,電子自旋之間會(huì)發(fā)生耦合,共有四種可能的耦合方式,其中三種屬于三重態(tài)的耦合方式,一種是單重態(tài)的耦合方式,電子空穴復(fù)合時(shí),隨機(jī)選擇一種,概率上講,有四分之一的選中了單重態(tài),因而熒光量子產(chǎn)率的上限就是25%。
電致激發(fā),大致是在電場(chǎng)作用下,電子和空穴復(fù)合形成激子,這里的激子就是激發(fā)態(tài)的,它不是從基態(tài)躍遷上來(lái)的。
熒光染料材料的量子效率不超過(guò)25%,我們大家都應(yīng)該了解清楚,希望大家能夠清楚認(rèn)識(shí)這點(diǎn)。
熒光染料是指某一波長(zhǎng)的光波后發(fā)射出另一波長(zhǎng)大于吸收光的光波的物質(zhì),多是含有苯環(huán)或雜環(huán)并帶有共軛雙鍵的化合物。
常用熒光染料具體介紹如下:
(一)**熒光標(biāo)記常用的熒光染料
FITC(異硫氰酸熒光素):綠色530nm
PE(藻紅蛋白):橙黃色575nm
488nm波長(zhǎng)的氬離子激光激發(fā)
APC(別藻青蛋白):紅色660nm
630nm波長(zhǎng)的氦氖激光或紅色二極管激光激發(fā)
PerCP(多甲藻黃素葉綠素蛋白):深紅色675nm
PI(碘化丙啶):橙紅色620nm
(二)細(xì)胞自發(fā)熒光
自發(fā)熒光信號(hào)為噪聲信號(hào),在多數(shù)情況下會(huì)干擾對(duì)特異熒光信號(hào)的分辨和測(cè)量。在**細(xì)胞化學(xué)等測(cè)量中,對(duì)于結(jié)合水平不高的熒光抗體來(lái)說(shuō),如何提高信噪比是個(gè)關(guān)鍵。
(三)**熒光標(biāo)記
常用的標(biāo)記染色為直接**熒光染色和間接**熒光染色。在進(jìn)行雙參數(shù)或多參數(shù)分析時(shí),常常需要進(jìn)行熒光抗體的組合標(biāo)記,目前已經(jīng)有雙色、三色以及四色標(biāo)記。