基本信息

貨號：17030（25 mg）

儲存方式：-20℃避光

結(jié)構(gòu)式：

分子量：307.09

外觀：白色

儲存：DMSO

生物應用

5-溴-2-脫氧尿苷（BrdU）是胸苷的類似物，可以摻入新合成的復制細胞DNA（S期細胞）中。 BrdU通常用于檢測活組織中的增殖細胞。 它通過在DNA復制過程中取代胸苷并將其自身整合到新合成的DNA中（在S期期間）起作用。 然后可以使用對BrdU特異的抗體來檢測摻入的化學物質(zhì)，從而指示活躍地復制其DNA的細胞。 因為BrdU可以在細胞分裂的S期中替代胸苷，它可以引起突變。

染色細胞樣本分析

以下程序適用于大多數(shù)細胞類型。生長培養(yǎng)基，細胞密度，其他細胞類型的存在和其他因素可能影響Brdu摻入。

1）。 制備1-10mM DMSO儲備溶液。 如果儲存在-20°C，DMSO儲備溶液可以使用6個月。

2）。 通過離心沉淀細胞并將細胞重懸于完全生長的培養(yǎng)基中。 培養(yǎng)物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。

3）。 使用5和20μM之間的濃度添加Brdu染色，并將其孵育60分鐘至過夜。 孵育時間取決于細胞類型和實驗目標。

4）。 用70-80％酒精或酸 - 乙醇固定細胞20-30分鐘。

5）。用PBS洗滌（3次，每次2分鐘）。

6）。 繼續(xù)進行**細胞化學染色。

參考文獻

1. Zeng Y, Wang Y. (2006) Sequence-dependent formation of intrastrand crosslink products from the UVB irradiation of duplex DNA containing a 5-bromo-2'-deoxyuridine or 5- bromo-2'-deoxycytidine. Nucleic Acids Res. 

2. Kuwagata M, Ogawa T, Nagata T, Shioda S. (2006) The evaluation of early embryonic neurogenesis after exposure to the genotoxic agent 5-bromo-2'-deoxyuridine in mice. Neurotoxicology.

3. Sahambi SK, Hales BF. (2006) Exposure to 5-bromo-2'-deoxyuridine induces oxidative stress and activator protein-1 DNA binding activity in the embryo. Birth Defects Res A Clin Mol Teratol, 76, 580.