噻唑橙是用于網(wǎng)織紅細(xì)胞分析的熒光DNA結(jié)合染料。它對(duì)瘧原蟲物種分析也很有用。改性噻唑橙衍生物(如SYBR Green,PicoGreen,TOTO和YOYO)廣泛用于檢測(cè)DNA樣品。
染色細(xì)胞示例
以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。生長(zhǎng)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,其他細(xì)胞類型的存在和其他因素可能影響染色。玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物的真實(shí)或明顯染色,導(dǎo)致在有或沒(méi)有細(xì)胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。
1)制備1-10mM DMSO儲(chǔ)備溶液。如果儲(chǔ)存在-20°C,DMSO儲(chǔ)備液可以保存6個(gè)月。
2)使用適合您樣品的固定方案。
3)通過(guò)離心沉淀細(xì)胞,并將細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中,在pH 7.4下進(jìn)行染料染色。培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。
4)使用0.5和10μM之間的濃度添加噻唑橙染色并孵育15至60分鐘。
注意:在的實(shí)驗(yàn)中,在整個(gè)建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度確定產(chǎn)生染色的濃度。