染色細胞分析方案
以下程序適用于大多數(shù)細胞類型。 生長培養(yǎng)基,細胞密度,細胞類型和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物染色,導(dǎo)致在沒有細胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。
通過離心沉淀細胞并將細胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中,經(jīng)過測試染料的佳結(jié)合pH為7.4。培養(yǎng)物中的貼壁細胞可以在蓋玻片上或細胞培養(yǎng)孔中原位染色。Hoechst的染色濃度為0.5-5μM,并將其孵育15至60分鐘。在初的實驗中,好在整個建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度,以確定產(chǎn)生佳染色的濃度。
參考文獻
Amine terminated G-6 PAMAM dendrimer and its interaction with DNA probed by Hoechst 33258
Authors: Choi YS, Cho TS, Kim JM, Han SW, Kim SK.
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Design of new bidentate ligands constructed of two Hoechst 33258 units for discrimination of the length of two A3T3 binding motifs
Authors: Tanada M, Tsujita S, Sasaki S.
Journal: J Org Chem (2006): 125
DNA sequence recognition by Hoechst 33258 conjugates of hairpin pyrrole/imidazole polyamides
Authors: Correa BJ, Canzio D, Kahane AL, Reddy PM, Bruice TC.
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Recognition of B-DNA by neomycin--Hoechst 33258 conjugates
Authors: Willis B, Arya DP.
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