染色細(xì)胞分析方案
以下程序適用于大多數(shù)細(xì)胞類型。 生長(zhǎng)培養(yǎng)基,細(xì)胞密度,細(xì)胞類型和其他因素可能影響染色。 玻璃器皿上的殘留洗滌劑也可能影響許多生物染色,導(dǎo)致在沒有細(xì)胞存在的溶液中出現(xiàn)明亮染色的物質(zhì)。
通過離心沉淀細(xì)胞并將細(xì)胞重懸于緩沖鹽溶液或培養(yǎng)基中,經(jīng)過測(cè)試染料的佳結(jié)合pH為7.4。培養(yǎng)物中的貼壁細(xì)胞可以在蓋玻片上或細(xì)胞培養(yǎng)孔中原位染色。Hoechst的染色濃度為0.5-5uM,并將其孵育15至60分鐘。在初的實(shí)驗(yàn)中,好在整個(gè)建議范圍內(nèi)嘗試幾種染料濃度,以確定產(chǎn)生染色的濃度。