DiBAC4(3)鈣離子熒光探針是一種細(xì)胞膜電位敏感的親脂性陰離子熒光染料，DIBAC4(3)本身無(wú)熒光，當(dāng)進(jìn)人細(xì)胞與胞漿內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合后才發(fā)出熒光，DIBAC4(3)鈣離子熒光探針進(jìn)入細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度增加，即膜電位增加表示細(xì)胞去極化；反之，細(xì)胞內(nèi)熒光強(qiáng)度降低即膜電位降低表示細(xì)胞超極化。DiBAC4(3)鈣離子熒光探針是目前*常用的線粒體膜電位檢測(cè)熒光探針。
1、過(guò)程概述

   用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí)，F(xiàn)luo-3 AM的常用濃度為5μM。通常用含有5μM的Fluo-3 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在37℃孵育30-60分鐘進(jìn)行熒光探針裝載，隨后適當(dāng)洗滌，洗滌后可以考慮適當(dāng)再孵育20-30分鐘以確保Fluo-3 AM在細(xì)胞內(nèi)完全轉(zhuǎn)變成Fluo-3。然后在流式細(xì)胞儀上進(jìn)行檢測(cè)。

2、Fluo-3AM使用液的配置

   100ug的Fluo-3AM，分子量是1219.9。按實(shí)際需要的摩爾濃度折算，無(wú)水DMSO溶解。一般配置成1~5mM的DMSO儲(chǔ)存液。如出現(xiàn)難溶現(xiàn)象，可以用20%的F127的DMSO溶液助溶。

注意事項(xiàng)：

   1、熒光染料有淬滅問(wèn)題，應(yīng)盡量避光保存；

   2、實(shí)驗(yàn)時(shí)注意個(gè)人防護(hù)，戴手套、口罩；

應(yīng)用舉例

2、貯存液的配制（5000μM/L）