流式細(xì)胞儀,一項(xiàng)可以推動(dòng)醫(yī)學(xué)、生命科學(xué)快速發(fā)展的發(fā)明,與傳統(tǒng)的**熒光、**印跡相比,流式的優(yōu)點(diǎn)很多:1.陽(yáng)性細(xì)胞比例的確定2.同時(shí)檢測(cè)多種蛋白3.簡(jiǎn)便的蛋白定量操作4.速度與靈敏度極高。
流式細(xì)胞儀也卻是一種讓人既愛(ài)又恨的儀器。愛(ài)在它可以自動(dòng)分析、篩選細(xì)胞,快速測(cè)量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細(xì)胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量,并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把指定的細(xì)胞亞群從中分選出來(lái);恨就恨在熒光補(bǔ)償實(shí)在是一個(gè)非常麻煩的過(guò)程。文獻(xiàn)中提到過(guò),哺乳動(dòng)物細(xì)胞的自發(fā)熒光來(lái)源很復(fù)雜,如煙酰胺腺嘌呤二核苷酸 NAD,煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH,黃素等。而且除了自發(fā)熒光,細(xì)胞固定液、染液也有可能會(huì)導(dǎo)致熒光改變。這些雜七雜八的熒光混在一起對(duì)各個(gè)波段的熒光檢測(cè)有很大的影響,再加上這些自發(fā)熒光的光譜通常都很寬,與大部分熒光染料光譜重合,對(duì)熒光補(bǔ)償來(lái)說(shuō)更是難上加難。
哪里有困難,哪里就有解決辦法,*近聽(tīng)到公司大牛提到光譜流式細(xì)胞儀已超越傳統(tǒng)流式,可以解決熒光補(bǔ)償?shù)膯?wèn)題,可能在未來(lái)成為流式的主導(dǎo),我也是一個(gè)激靈,想起自己當(dāng)初做實(shí)驗(yàn)時(shí)的滿面愁容,我懷著激動(dòng)的心情,詳細(xì)的了解了一下光譜流式。(注:公司不售流式,僅做科普,不是廣告。)
采用棱鏡模組分光和磚利技術(shù) 32 聯(lián)排 PMT,實(shí)現(xiàn) 420-800nm 波長(zhǎng)范圍內(nèi)光譜熒光信號(hào)檢測(cè)。該技術(shù)的實(shí)現(xiàn)也突破了傳統(tǒng)流式的諸多限制,標(biāo)志著光譜流式時(shí)代的到來(lái)!
常規(guī)流式與光譜流式對(duì)比

如何才能破解自發(fā)熒光干擾?

全光譜流式細(xì)胞儀實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞自發(fā)熒光從 420nm-800nm 波長(zhǎng)范圍光譜掃描,軟件可以幫助我們快速的找出并計(jì)算得到不同的自發(fā)熒光的光譜線。系統(tǒng)將這些自發(fā)熒光與染料熒光同時(shí)分析;利用自發(fā)熒光光譜與染料熒光光譜的差異,結(jié)合統(tǒng)計(jì)學(xué)算法,完成了對(duì)染料熒光和自發(fā)熒光的拆分。
說(shuō)到這里,許多人想,傳統(tǒng)流式都用了這么多年了,各種方法早已爛熟于心了,我不想再重新嘗試了,這讓我不禁想起之前看到的一段話: 多色流式的熒光補(bǔ)償概念根深蒂固,很多用戶向光譜流式轉(zhuǎn)化看起來(lái)太痛苦了。 我不斷提出這樣的問(wèn)題:“當(dāng)我們有機(jī)會(huì)去除流式細(xì)胞儀的這個(gè)**的Bug時(shí),為什么我們還要花費(fèi)這么多時(shí)間和精力專注于補(bǔ)償呢?” 一個(gè)又一個(gè)教程,一篇又一篇Paper,一個(gè)又一個(gè)問(wèn)題。痛苦難道是流式細(xì)胞術(shù)的必要組成部分嗎?——J. Paul Robinson(光譜流式***)??茖W(xué)使人類進(jìn)步,同時(shí)人類也推動(dòng)科學(xué)進(jìn)步,做出新的嘗試,新的改變,未嘗不是一種新的進(jìn)步呢?改變吧,科研不加班!
百螢生物,是美國(guó)AAT Bioquest的中國(guó)代理商,出售各類熒光探針/試劑盒,提供各類定制、技術(shù)服務(wù),產(chǎn)品涉及:細(xì)胞檢測(cè)、生化檢測(cè)、熒光標(biāo)記探針、高通量篩選等,試劑/試劑盒可應(yīng)用于各類流式細(xì)胞儀、酶標(biāo)儀、顯微鏡,歡迎咨詢、選購(gòu)!