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公司新聞

百螢生物帶你走近細胞凋亡(一)

細胞凋亡之所以成為人們研究的一個熱點,在很大程度上決定于細胞凋亡與臨床病毒的密切關系。這種關系不僅表現(xiàn)在凋亡及其機制的研究,闡明了一大類**病的發(fā)病機制,而且由此可以導致**新療法的出現(xiàn)。今天百螢就帶大家了解一下細胞凋亡。


細胞凋亡

概念:多細胞生物的細胞高度組織和嚴格調(diào)節(jié),以確保維持適當?shù)姆€(wěn)態(tài)平衡,從而
使生物體*佳地發(fā)揮作用。細胞通常以兩種方式調(diào)節(jié):一種通過增殖速率(細胞分
裂),另一種是凋亡率(細胞死亡)。通過稱為程序性細胞死亡或凋亡的過程激活
細胞內(nèi)死亡信號傳導途徑,不再需要的細胞誘導**。例如,在青蛙發(fā)育期間,在
水生蝌蚪中形成尾部所需的細胞將啟動細胞凋亡,導致這些細胞死亡。隨著蝌蚪成
熟為更加陸地的成年青蛙,其尾巴將完全消失。

機制:細胞凋亡通常在發(fā)育和衰老期間發(fā)生,并且還作為響應細胞損傷或**反應
的防御機制。它與正常的細胞更新,**系統(tǒng)的正常發(fā)育和功能,**依賴性萎縮
和化學誘導的細胞死亡有關。細胞凋亡的生化事件導致特定的特征或形態(tài)學細胞變
化,這對于受控和**的細胞死亡是必需的,沒有任何破壞性或不佳的炎癥反應。
這些形態(tài)變化包括起泡,細胞皺縮,核碎裂,染色質(zhì)濃縮和染色體斷裂。細胞凋亡
始于細胞萎縮和凝結。細胞骨架坍塌,核膜解體,核 DNA 分裂成碎片。細胞凋亡
過程中產(chǎn)生的這些有機細胞片段稱為凋亡小體。然后以這樣的方式修飾細胞表面以
表達特定的表面標志物,其導致凋亡細胞在其內(nèi)容物發(fā)生任何泄漏之前被**系統(tǒng)
快速吞噬。凋亡的關鍵優(yōu)勢是通過攝取細胞再循環(huán)凋亡小體或凋亡細胞的有機組
分。

區(qū)別:細胞壞死與程序性細胞凋亡相反,細胞和活組織可能由于急性細胞損傷,感
染或稱為細胞壞死的炎癥而經(jīng)歷未編程的過早死亡。壞死損害了細胞的穩(wěn)態(tài)能力,
導致水和細胞外離子的流入,導致細胞膨脹和破裂。壞死細胞的細胞質(zhì)內(nèi)容物溢出
到細胞外液中,引發(fā)強烈的炎癥反應,這對細胞和組織有廣泛的破壞作用。

半胱氨酸蛋白酶檢測及相關探針:


細胞凋亡所必需的機制涉及高度復雜的能量依賴性級聯(lián)途徑,其由稱為半胱天
冬酶的蛋白酶家族調(diào)節(jié)。它們作為潛在酶或稱為 procaspase 的無活性前體存在于
所有細胞中。Caspase 活性在細胞內(nèi)受到嚴格調(diào)節(jié),以確保細胞凋亡在需要時保
持無活性。當需要細胞凋亡時,半胱天冬酶通過蛋白水解切割啟動活化。這些半胱
天冬酶是與凋亡相關的復雜生化事件的關鍵介質(zhì)。因此,已經(jīng)開發(fā)了各種比色,熒
光和流式細胞術半胱天冬酶測定法用于檢測和檢查凋亡誘導細胞中的活性半胱天冬
酶。引入半胱天冬酶測定技術以檢查半胱天冬酶活性的活性,底物特異性和活化狀
態(tài),其對應于其在半胱天冬酶級聯(lián)途徑中的位置。了解 caspase 級聯(lián)中每種酶的
特定功能可以作為決定適當分析的決定因素,從而產(chǎn)生*佳結果。熒光和比色測定
使用半胱天冬酶酶活性和特異性報告底物來產(chǎn)生可檢測的信號,其可以通過酶標儀
測量或用顯微鏡成像。通過半胱天冬酶和報道底物之間的相互作用引發(fā)底物的切
割。從基材上切割下來,熒光發(fā)色團將改變顏色或發(fā)出熒光,該熒光與存在的半胱
天冬酶的活性成比例。與比色測定相比,熒光測定具有輕微的優(yōu)勢,因為它們具有
更高的靈敏度,在更寬的動態(tài)范圍內(nèi)測量的能力以及具有更低背景信號的傾向。與
比色測定相關的主要優(yōu)點是通過可見的顏色變化檢測信號,并且與其他市售測定相
比,它相對便宜。

為了檢測和分析半胱天冬酶活性,百螢生物提供多種選擇的半胱天冬酶抑制
劑,熒光半胱天冬酶底物和半胱天冬酶試劑盒。我們的發(fā)光半胱天冬酶底物基于用
(4-PNA)修飾特定肽序列。此外,我們是唯壹一家提供基于 AMC,AFC,羅丹明
110(R110)和 ProRed?的四種不同熒光顏色的多色底物的公司。這些底物可單獨
購買,也可在試劑盒中一起包裝,以同時監(jiān)測多重化合物分析中多種半胱天冬酶的活化。

(有關細胞凋亡檢測試劑和關鍵特征的概述,請參見下表)



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